A série narra as aventuras do Tio Patinhas, personagem das histórias em quadrinhos da Disney criado por Carl Barks, junto com seus sobrinhos-netos Huguinho, Zezinho e Luisinho, além de vários outros personagens criados exclusivamente para a série. Apesar dos três sobrinhos originalmente surgirem nos curtas animados na década de 1930 do Pato Donald, a sua caracterização em DuckTales está mais aproximada a dos quadrinhos de Barks.